Что означает анализ крови на вич. Анализы для обнаружения вируса иммунодефицита - эффективные методы диагностики вич. Что такое спид и чем он опасен

Описание

Метод определения Иммуноферментный анализ (ИФА).

Исследуемый материал Сыворотка крови

Комбинированное выявление антител к ВИЧ типов 1 и 2 и антигена р24 ВИЧ, качественный тест.

Внимание. При положительных и сомнительных реакциях, срок выдачи результата может быть увеличен до 10-ти рабочих дней. ВИЧ (вирус иммунодефицита человека), вызывающий СПИД (синдром приобретенного иммунодефицита) - принадлежит к семейству ретровирусов. Передается от человека к человеку при использовании загрязненных игл и шприцев для внутривенного введения наркотиков или терапевтических процедур, при сексуальных контактах, как гетеро, так и гомосексуальных. Передача вируса может произойти при переливании инфицированной крови и ее продуктов, донорстве органов или семенной жидкости, у медицинских работников - при ранении инфицированными иглами или инструментами. Заражение ВИЧ возможно путем его передачи от инфицированной матери ребенку (вертикальный путь), хотя современные методы профилактики с применением антиретровирусной терапии, при выполнении всех рекомендаций, позволяют снизить такой риск до минимума.

Процесс взаимодействия вируса с клеткой включает ряд стадий: связывание вируса с клеткой, освобождение его от оболочки, проникновение в цитоплазму, синтез ДНК по вирусной РНК, встраивание вирусной ДНК в геном клетки-хозяина. После этого начинается латентная стадия инфекции. В таком состоянии провирусная ДНК может существовать некоторое время, не проявляя активности и не влияя на жизнедеятельность клетки-хозяина. Пока нет экспрессии вирусных белков, нет и иммунного ответа на вирус. Антитела к ВИЧ, характеризующие иммунный ответ организма, появляются после активации вирусной ДНК и начала активного размножения вируса. Длительность латентного периода зависит от ряда факторов, включая и индивидуальные генетические особенности организма.

Антитела к ВИЧ могут появиться, начиная со второй недели после инфицирования; их содержание увеличивается в течение 2-4-х недель и сохраняется на протяжении многих лет. У 90-95% инфицированных они появляются в первые три месяца после заражения, у 5-9% - в период от трех до шести месяцев, у 0,5-1% – в более поздние сроки.

В первые недели инфекции, еще до появления антител к вирусу (т.е. до сероконверсии), в образцах сыворотки или плазмы можно выявить присутствие антигенов ВИЧ, в том числе его капсидного белка р24. Позже, после сероконверсии, он обычно становится недетектируемым.

Комбинированные тест-системы 4-го поколения, к которым относится тест HIV Ag/Ab Combo (Architect, Abbott), выявляют как антитела к ВИЧ 1 и 2 типов, так и антиген р24 ВИЧ, что позволяет проводить раннее обнаружение инфекции. К особым характеристикам применяемого в лаборатории ИНВИТРО скринингового теста для выявления ВИЧ-инфекции стоит отнести высокую специфичность исследования (> 99,5%); 100% чувствительность анализа к антителам, характерным для периода сероконверсии, и чувствительность теста к антигену р24 порядка 18 пг/мл.

Порядок проведения лабораторного обследования на ВИЧ строго регламентирован приказами МЗ РФ и включает в себя этап скринингового (отборочного) исследования наличия антител к ВИЧ иммуноферментными (ИФА) методами, разрешенными к использованию, и этап верификационного (подтверждающего) более развернутого исследования в лаборатории городского центра СПИД. Следует отметить, что даже лучшие скрининговые ИФА-системы не гарантируют 100% специфичности, то есть существует некоторая вероятность получения неспецифических, ложноположительных результатов, связанных с особенностями сыворотки крови пациента. Поэтому положительный результат скринингового ИФА обследования может не подтвердиться в подтверждающих тестах, после чего пациенту выдадут отрицательный или неопределенный результат. При неопределенном результате подтверждающего исследования тестирование следует повторить в динамике через 2-3 недели.

Лабораторная диагностика ВИЧ инфекции у детей, рожденных от ВИЧ-инфицированных матерей, имеет свои особенности. В их крови до 18-ти месяцев с момента рождения могут циркулировать материнские антитела к ВИЧ (класса IgG). Отсутствие антител к ВИЧ у новорожденных не означает, что вирус не проник через плацентарный барьер. Дети ВИЧ-инфицированных матерей подлежат лабораторно-диагностическому обследованию в течение 36-ти месяцев после рождения.

Подготовка

Специальная подготовка не требуется. Рекомендуется взятие крови не ранее чем через 4 часа после последнего приема пищи. С общими рекомендациями для подготовки к исследованиям можно ознакомиться . Целесообразно проводить исследование на обнаружение антигена и антител к ВИЧ не раньше, чем через две недели после возможного инфицирования, с повторением его через три и шесть недель в случае отрицательного результата. Оформление заявок для проведения исследований в ООО «ИНВИТРО» осуществляется по паспорту или документу, его заменяющему (миграционная карта, временная регистрация по месту жительства, удостоверение военнослужащего, справка из паспортного стола при утере паспорта, регистрационная карта учёта из гостиницы). Предъявленный документ в обязательном порядке должен содержать информацию о временной или постоянной регистрации на территории РФ и фотографию. При отсутствии паспорта (документа его заменяющего) пациент вправе оформить анонимную заявку для сдачи биоматериала. При анонимном обследовании, заявке и полученному от клиента образцу биоматериала присваивается номер, известный только пациенту, и медперсоналу, оформлявшему заказ. ! Результаты исследований, выполненных анонимно, не могут быть представлены для госпитализации, профессиональных осмотров и не подлежат регистрации в ОРУИБ.

Показания к назначению

• Увеличение лимфатических узлов более двух областей.
• Лейкопения с лимфопенией.
• Ночная потливость.
• Резкое похудание неясной причины.
• Диарея более трех недель неясной причины.
• Лихорадка неясной причины.
• Планирование беременности.
• Предоперационная подготовка, госпитализация.
• Выявление следующих инфекций или их сочетаний: туберкулез, манифестный токсоплазмоз, часто рецидивирующая герпесвирусная инфекция, кандидоз внутренних органов, повторные невралгии герпес-zoster, вызванная микоплазмами, пневмоцистой или легионеллами пневмония.
• Саркома Капоши в молодом возрасте.
• Случайные половые контакты.

Интерпретация результатов

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Единицы измерения в Независимой лаборатории ИНВИТРО: тест качественный. Форма представления результатов: при отсутствии антител к ВИЧ 1 и 2 и антигена р24 выдается ответ «отрицательно». В случае обнаружения антител к ВИЧ или антигена в скрининговом иммуноферментном тесте пробу сыворотки отправляют для исследования подтверждающим методом иммуноблота в городской центр СПИД, который верифицирует положительные и неопределенные результаты.

Положительный результат:

1. ВИЧ - инфекция;
2. ложноположительный результат, требующий повторных или дополнительных исследований*);
3. исследование неинформативно у детей до 18 мес, рожденных от ВИЧ-инфицированных матерей.

*Специфичность скрининговой тест-системы Антитела к ВИЧ 1 и 2 и антиген ВИЧ 1 и 2 (HIV Ag/Ab Combo, Abbott), по оценкам, представленным производителем реагентов, составляет около 99,6% как в общей популяции, так и в группе пациентов с потенциальными интерференциями (инфекции HBV,HCV, Rubella, HAV, EBV, HNLV-I, HTLV-II, E.coli, Chl.trach. и др., аутоиммунные патологии (включая ревматоидный артрит, присутствие антинуклеарных антител), беременность, повышенный уровень IgG, IgM, моноклональные гаммапатии, гемодиализ, множественные гемотрансфузии).

В результате попадания вируса в организм поражаются многие звенья иммунной системы, и человек становится открытым для остальных инфекционных агентов. Анализ на ВИЧ нужно сдать всем, кто знает о возможном риске заражения, также регулярно сдавать людям, тесно контактирующим с вирусоносителями.

У каждого человека, который заразился, вирусные частицы определяются на разных стадиях. Возбудитель может не обнаруживаться около года, но чаще анализ на ВИЧ инфекции выявляет возбудитель уже через месяц после заражения.

Специалисты отмечают наличие у некоторых пациентов временного интервала, когда даже при высокой вирусной нагрузке возбудитель не обнаруживается. Такое явление в лабораторной диагностике называют «серонегативным окном». Рекомендуется спустя полгода пройти обследование повторно.

Какие анализы сдают на ВИЧ-инфекцию - самые точные методы исследования

Высокая вирусная нагрузка обычно обозначает пониженный иммунный статус пациента, соответственно и небольшое количество CD4 клеток. Низкая концентрация вируса в крови наоборот - нормальный иммунитет и высокое содержание CD4 клеток.

Анализы при ВИЧ инфекции, которые проводились методом ПЦР и показывают количество копий РНК возбудителя на мл> 74100, могут обозначать ближайшее развитие клинической картины СПИДа. Чем ниже уровень виремии, тем лучше прогноз заболевания.

Как называется анализ на ВИЧ для определения иммунного статуса?

Количество клеток CD4 характеризует состояние иммунной системы - показатель, который крайне важен для больных. У здорового человека количество таких клеток колеблется в диапазоне 600 - 1900 единиц на кубический миллиметр крови. Показатель может превышаться или быть ниже нормы.

Анализ сдают при ВИЧ для того, чтобы:

• Наблюдать за степенью поражения иммунной системы;
• Вовремя диагностировать СПИД;
• Определить, когда необходимо начинать антиретровирусную терапию;
• Оценить риск развития сопутствующих инфекций.

Этот анализ надо сдавать на ВИЧ каждые три месяца или полгода. Специалист, оценив показатели измерения CD4 и состояние здоровья пациента, назначит время следующей процедуры забора крови для исследования.

При обращении человека в специализированный центр, на карте указывают код. Существуют коды анализов ВИЧ, которые разделяют обследуемых по контингентам. Такая необходимость появилась из-за особых требований к оформлению направлений на исследование.

Если исходя из симптомов есть подозрение на ВИЧ, какие анализы нужны для эффективной диагностики, можно узнать в любом специализированном центре. Такие медицинские учреждения государственные, поэтому оплачивать прием у врача не придется.

Анализ крови на ВИЧ или тест на ВИЧ включает в себя несколько методов лабораторной диагностики, позволяющих выяснить присутствие вируса иммунодефицита (ВИЧ), обнаружить антитела к его белкам (иммуноглобулины) или антигены (белки вируса) в крови больного, слюне или моче. Вирусу иммунодефицита человека присуща уникальная антигенная изменчивость, что связано с большой скоростью транскрипции (размножения), в связи с чем затрудняется как диагностика ВИЧ-инфекции, так и ее профилактика.

В основе диагностики ВИЧ-инфекции, как и любого другого инфекционного заболевания лежит:

• эпидемиологический анамнез,
• характерные жалобы больного,
• клиническая картина заболевания,
• данные лабораторных методов исследования.

Как только диагноз ВИЧ-инфекции установлен, с целью уточнения характера течения основного заболевания и вторичных заболеваний проводится дальнейшее обследование больного и назначается соответствующее лечение.

Тяжесть заболевания оценивается по уровню концентрации вирусов в крови, количеству CD4-лимфоцитов и определению антигена р24.

Основные виды диагностики ВИЧ-инфекции

Вирусологическая диагностика основана на выявлении ВИЧ в тканях и биологических жидкостях больного.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) применяется с целью выявления вируса и оценки вирусной нагрузки, что позволяет судить об эффективности специфического лечения и прогнозировать течение инфекционного заболевания.

Серологическая диагностика ВИЧ-инфекции предполагает выявление антигенов вируса и антител в сыворотке крови. Обнаружение антител к с помощью ИФА (иммуноферментного анализа) является основным методом лабораторной диагностики. Все положительные результаты подтверждаются методом иммуноблоттинга. основан на выявлении антител в крови и биологических жидкостях исследуемого. Используются в случаях, когда необходимо быстро получить результат.

Уровень иммуносупрессии определяется методикой подсчета СD4 и СD8-лимфоцитов, с последующим определением соотношения CD4: CD8.

Каждый из лабораторных методов диагностики ВИЧ-инфекции характеризуется определенной чувствительностью (% верно определенных среди заведомо (+) образцов) и специфичностью (% правильно определенных тестов среди заведомо отрицательных образцов). Результаты теста на ВИЧ интерпретируются как отрицательные, положительные или сомнительные.

Рис. 1. На фото слева ВИЧ заражают иммунную клетку (обозначено желтым). На фото справа лимфоцит, поражённый ВИЧ. Вытянутые структуры на поверхности клетки вызваны гиперпродукцией белка.

Рис. 2. На фото зафиксирован процесс выхода (отпочкования) вирионов из инфицированной клетки.

Анализ крови на ВИЧ. Что надо знать

Анализ крови на ВИЧ может сделать любой житель нашей страны по своему желанию анонимно и бесплатно. Но есть категории лиц, которые обследуется на ВИЧ в обязательном порядке. К ним относятся:

• все доноры крови и ее компонентов, а также тканей и других биологических жидкостей;
• лица, которым была проведена трансфузия или осуществлена трансплантация (проводится в течение первых 3-х месяцев после проведения процедуры);
• беременные;
• лица, пострадавшие в результате аварии;
• лица, имеющие клинические показания — лихорадку, диарею, постоянный кашель и увеличение более 2-х групп лимфатических узлов, длящиеся более 1-го месяца, необъяснимую потерю веса, СПИД-ассоциированные и оппортунистические инфекционные заболевания, соматическая и онкопатология;
• иностранные граждане;
• лица из группы риска (наркоманы и страдающие венерическими заболеваниями).

Тест на ВИЧ необходимо проводить всем, кто был подвергнут риску заражения.

Рис. 3. Анализ крови на ВИЧ в нашей стране можно сдать анонимно и бесплатно.

Где сдать кровь на ВИЧ

Анализ на ВИЧ можно сдать бесплатно в учреждениях здравоохранения, работающих на бюджетной основе при наличии паспорта и медицинской страховки. Врачи при этом обязаны хранить врачебную тайну. Бесплатно и анонимно можно сдать анализ в Центрах профилактики и борьбы со СПИДом и там же получить врачебную консультацию до и после обследования. На платной основе проводится тестирование на ВИЧ в коммерческих лечебных учреждениях. Тест на ВИЧ может пройти любой человек, временно проживающий на данной территории.

В лаборатории будет сделан анализ крови на ВИЧ иммуноферментным методом (ИФА).

Анализ на ВИЧ анонимно

В государственных учреждениях здравоохранения (поликлиниках и больницах) анонимно сдать анализ крови на ВИЧ нельзя. Сведения о результатах исследования будут известны узкому кругу медиков, которые обязаны хранить врачебную тайну.

Кабинеты анонимного тестирования существуют на базах Центров СПИДа, где каждому исследованию присваивается номер.

Рис. 4. Пробирки с кровью отправляются на серологическое исследование.

Анализ на ВИЧ принудительно

Существует четыре группы населения, тестирование на ВИЧ которых является обязательным, но не насильственным:

1. Доноры крови и другого биологического материала.
2. При устройстве на работу в учреждения, где работник может иметь контакт с заведомо инфицированным материалом и больными.
3. Иностранные граждане при получении виз для проживания (более 3-х месяцев) на территории РФ.
4. При наличии клинических показаний лицам, находящихся в местах лишения свободы.

Принудительное тестирование населения на ВИЧ является бесперспективным и противоречит соблюдению прав человека. Принудительное тестирование населения в РФ является незаконным.

Рис. 5. Тестирование на ВИЧ осужденных проводится по клиническим показаниям.

Сколько стоит анализ на ВИЧ

В государственных учреждениях обследование на ВИЧ бесплатное, в частных клиниках — платное:

• Стоимость ИФА составляет от 400 до 800 руб. Ответ будет готов по истечении одних суток. Существует срочная диагностика, когда ответ можно получить в течение 2-х часов.
• Стоимость анализа на ВИЧ методом иммуноблота составляет от 3 до 5 тыс. рублей. Результат будет готов через 4 — 7 дней.
• Стоимость теста на ВИЧ методом ПЦР составляет 10 — 12 тыс. руб. Результат будет готов через 10 — 14 дней.

Сколько делается анализ на ВИЧ

В государственных учреждениях срок получения результатов анализа на ВИЧ составляет:

• При применении ИФА 3-го поколения результаты дают самый достоверный результат через 12 недель от момента предполагаемого инфицирования.
• При применении ИФА 4-го поколения — 6 недель.
• При применении ПЦР — 4 недели.

Как сдавать анализ на ВИЧ

• Сдавать анализ на ВИЧ необходимо не ранее, чем через 3 — 4 недели от предполагаемого заражения.
• Тестирование проводится не ранее, чем через 8 часов после приема пищи.

Из жидкости можно употреблять только обычную воду.

• Для анализа осуществляется забор 3 — 5 мл крови, взятой из локтевой вены, для чего используется обычный шприц или игла с помпой.
• До транспортировки в лабораторию сыворотка крови может храниться в холодильнике до 7-и дней. Без холодильника не более 30 минут после забора.
• Транспортировка пробирок с сывороткой крови осуществляется в специальных термоконтейнерах при температуре +4 — +8 о С.

Рис. 6. Для анализа на ВИЧ необходимо провести забор 3 — 5 мл крови, взятой из локтевой вены — для чего используется обычный шприц (фото слева) или игла с помпой (фото справа).

При заборе крови из вены вирусом иммунодефицита человека заразиться невозможно.

Ложноположительный анализ на ВИЧ и другие виды результатов исследования

Результаты анализа на ВИЧ могут трактоваться как положительные, отрицательные и сомнительные.

Сомнительный результат теста на ВИЧ получается при присутствии в сыворотке крови антител, которые перекрестно реагируют с белками вируса иммунодефицита человека. Анализ в данном случае сдается повторно, а при его проведении будут применяться белее специфичные тест-системы. Если сомнительный результат сохраняется, то тестирование необходимо проводить каждые 1 — 3 месяца в течение полугода.

Положительный результат теста на ВИЧ (серопозитивный) говорит о наличии в крови исследуемого антител к вирусу. В данном случае иммуноферментный анализ (ИФА) повторяется и при получении повторного положительного результата подтверждается тестом иммуноблотинга с тем же образцом крови.

Отрицательный результат теста на ВИЧ (серонегативный) говорит об отсутствии ВИЧ-инфекции, либо инфицирование произошло совсем недавно и в крови обследуемого еще не выработались антитела (период «окна»). В таком случае обследование следует повторить через 3 и 6 месяцев.

Ложноположительный результат теста на ВИЧ регистрируется тогда, когда его причиной явился не вирус иммунодефицита человека, а беременность, аутоиммунное заболевание, аллергия, любое другое инфекционное заболевание, недавно сделанная прививка, онкопатология, трансплантация органа и даже обычная еда (семечки, острая, жирная и кислая пища, употребленная накануне, и даже минеральная сильногазированная вода). Большое количество ложноположительных результатов получается при проведении тестирование в домашних условиях.

Ложноотрицательный результат теста на ВИЧ говорит о том, что вирус в крови больного присутствует, но антитела еще не выработались. При проведении анализа ПЦР ложноотрицательный результат может быть получен у ВИЧ-инфицированных больных в период проведения специфического лечения, когда концентрация вирусов в крови настолько мала, что приводит к несрабатыванию тест-системы. В большинстве случаев ложноотрицательный результат получается при технической ошибке или браке в тест-системе, что встречается крайне редко ввиду проведения жесткого контроля качества на всех уровнях.

Анализ на ВИЧ необходимо отложить минимум на две недели после перенесенного инфекционного заболевания или вакцинации.

Рис. 7. Проведение серологического исследования крови.

Тест-системы, определяющие наличие антител к ВИЧ

При помощи тестирования на антитела к вирусу иммунодефицита человека оценивается ответ организма на инфицирование. С этой целью применяется иммуноферментный анализ (ИФА, ELISA), позволяющий обнаружить антитела к белкам вируса и подтверждающий анализ иммуноблотинг (вестерн-блот), при помощи которого определяется реакция антител на белки вируса.

Антитела к ВИЧ

Вирусы иммунодефицита человека обладают антигенными свойствами и при попадании в организм человека вызывают синтез антител — специфических иммуноглобулинов. С помощью современных тест-систем в сыворотке крови и других биологических жидкостях больного ВИЧ можно определить класс иммуноглобулинов (антител). Раньше всех (через неделю после инфицирования) появляются иммуноглобулины класса IgМ. Их рост отмечается в течение месяца и далее они сохраняются еще около 30 дней. Иммуноглобулины класса IgG циркулируют в крови несколько лет. Их выявление является показателем наличия ВИЧ-инфекции.

Антитела к ВИЧ появляются через 2 — 4 нед. после инфицирования и далее они определяются в крови на протяжении всего заболевания.

Период «окна» при ВИЧ

Антитела в организме инфицированного человека вырабатываются не сразу. На первых порах ВИЧ-инфекция ничем себя не проявляет. Антитела появляются в крови в среднем через 2 — 3 месяца от момента заражения (от 2-х недель до 6-и месяцев). Этот период получил названия «окна», когда анализы на антитела еще отрицательные, но вирусы интенсивно размножаются, а сам больной становится опасным в плане заражения контактных лиц. Выявить инфицированного можно через более короткий (1 — 2 недели) период после заражения, для чего применяется полимеразная цепная реакция (ПЦР). Однако из-за дороговизны данный вид исследования для скрининга не используется.

Иммуноферментный анализ при диагностике ВИЧ

У 90 — 95% инфицированных лиц антитела в сыворотке крови появляются через 3-и месяца после заражения, У небольшой части больных (5 — 9 %) антитела появляются в период от 3 до 9 месяцев и у 0,5 — 1% — в более поздние сроки. В терминальной стадии СПИДа количество антител снижается значительно, а в некоторых случая исчезают вовсе.

С 1985 года данная методика используется на территории РФ с целью массовых исследований. Он прост в исполнении, показывает довольно точные результаты, является дешевым по сравнению с другими методиками. В связи с возможностью получения ложноположительных результатов все положительные результаты исследуются дважды, после чего сыворотка крови больного исследуется подтверждающим тестом — иммунного блота. При этом используется тот же образец крови. При наличии 2-х положительных результатов с применением ИФА и иммуноблота в одной пробе ставиться диагноз ВИЧ-инфекции.

В РФ используются обычно ИФА 4-го поколения. Исследование проводится с целью получения суммарного спектра антител против белков (антигенов) ВИЧ — р24 и gр160.

Тест видит как антитела, которые вырабатываются организмом больного, так и антигены (белки вируса) р24. «Период окна» для тестов 4-го поколения более короткий. Уже через месяц можно получать достоверные результаты. Однако более надежными, как считают специалисты здравоохранения РФ, являются сроки 6, 8 или 12 недель.

Рис. 8. На фото иммуноферментные анализаторы.

Рис. 9. На фото иммуноферментный автоматический анализатор.

Для первичного обследования групп лиц с целью выявления ВИЧ-инфекции применяется только методика ИФА.

Метод иммуноблотинга

Метод иммуноблотинга является более точным, чем ИФА, по мнению большинства специалистов — эталонным. С его помощью в сыворотке крови обнаруживают антитела к белкам ВИЧ. Методика применяется с целью подтверждения результатов, полученных при проведении ИФА. Обладает высокой специфичностью. Ложноположительные результаты встречаются редко. Достоверность полученных результатов достигает 99%. Иммуноблотинг является дорогостоящей методикой и требует высокой специализации специалиста, проводящего исследование. Возможно получение сомнительных результатов.

Метод основан на разделении антигенов (белков) ВИЧ с применением электрофореза по молекулярной массе. Первыми при инфицировании выявляются антитела против капсидных белков «Gag» (р24 и р17) и прекурсор р55. Вслед за ними появляются антитела против суперкапсидных белков «Env » (гликопротеидов gр 160, gр120, gр41 и белков р88) и неструктурных белков «Pol» (р31, р51 и р66). В ряде случаев могут определяться антитела против генов «vpu », «vpr », «vif », «tat », «nef », «rev », «tat ».

Сыворотка крови больных ВИЧ-1 и ВИЧ-2 содержит антитела ко всем белкам вирусов, но для подтверждения диагноза определяются у ВИЧ-1 только антитела к белкам р24, gр41, gр120 и gр160, у ВИЧ-2 — антитела к белкам gр105, gр140 и gр36.

При наличии 2-х положительных результатов с применением ИФА и иммуноблота в одной пробе ставиться диагноз ВИЧ-инфекции.

Рис. 10. Аппарат для проведения исследования методом иммуноблота.

Рис. 11. Диагноз ВИЧ-инфекции ставиться при наличии 2-х положительных результатов с применением ИФА и иммуноблота в одной пробе.

Тест-системы для подсчета СД4-лимфоцитов

Одним из иммунологических тестов, применяемых при ВИЧ-инфекции, является методика подсчета СD4 и СД8-лимфоцитов в крови.

СD4-лимфоциты (Т-хелперы) поражаются вирусами иммунодефицита. Постепенное истощение их популяции приводит к снижению иммунитета и организм больного перестает противостоять инфекции. Подсчет CD4-лимфоцитов осуществляется методом проточной цитометрии с помощью автоматических анализаторов или вручную при оптической или флюоресцентной микроскопии. По количеству СD4-лимфоцитов определяется время начала специфического лечения (антиретровирусной терапии) и профилактики оппортунистических инфекций, оценивается эффективность лечения.

• При количестве CD4-лимфоцитов в сыворотке крови от 500 и ниже в 1 мл говорит о развитии иммунодефицита.
• При снижении количества CD4-лимфоцитов до 200 в 1 мл (норма от 600 до 1900 клеток в 1 мл) развивается синдром приобретенного иммунодефицита — СПИД.
• При снижении уровня CD4-лимфоцитов до 50 и ниже в 1 мкл СПИД переходит в терминальную стадию.

Удельный вес CD4-лимфоцитов среди всех лимфоцитов в норме составляет около 40%. Снижение показателя до 20% говорит о развитии СПИДа.

CD 8-лимфоциты (Т-киллеры, на англ. killer - убийца) уничтожают вирусы ВИЧ путем цитолиза. Их пролиферация (увеличение количества) зависит от активности Т-хелперов. При ВИЧ-инфекции количество CD4 и CD8-лимфоцитов уменьшается, но более всего падает уровень CD4-лимфоцитов. Соотношение CD4/ CD8 в норме составляет 1,5 — 2,5. При снижении количества CD4- лимфоцитов отмечается снижение индекса.

Его величина менее 1 говорит о развившемся иммунодефиците, при показателе соотношения 0,6 — 0,8 развивается СПИД.

При получении положительных результатов тестирования человек должен стать на учет в государственное учреждение Центр профилактики и борьбы со СПИД, где будет установлен мониторинг за его состоянием и назначено адекватное специфическое лечение.

Рис. 12. На фото проточные автоматические анализаторы с помощью которых осуществляется подсчет CD4-лимфоцитов в крови исследуемого.

Тест на ВИЧ с применением ПЦР

Все большее распространение в последние годы получает молекулярно-генетический метод диагностики ВИЧ-инфекции — полимеразная цепная реакция (ПЦР). С ее помощью определяется генетический материал возбудителя — РНК уже через 1 — 2 недели после предполагаемого заражения, а высокая чувствительность теста позволяет выявлять РНК вирусов даже если их в исследуемом материале находятся единицы. Данная методика является дорогостоящей и поэтому в настоящее время для скрининга не используется. К тому же значимой проблемой исследования является возможность получения ложноположительных результатов.

Суть методики ПЦР при ВИЧ

Суть данной методики заключается в получении множества копий РНК вируса (нуклеиновой кислоты), в последующем выявляемых как по характерному строению, так и с помощью меченых ферментов или изотопов.

Возможности ПЦР при ВИЧ-инфекции

С помощью ПЦР можно разрешить сомнительные результаты, полученные при применении методики иммуноблотинга, диагностировать ВИЧ-инфекцию на ранних стадиях (уже через 1 — 2 недели после предполагаемого заражения), контролировать эффективность проводимой антиретровирусной терапии, определять стадию заболевания.

Рис. 13. На фото слева нормальный Т-лимфоцит, справа — Т-лимфоцит, инфицируемый ВИЧ. Видны множественные пузыри, между которыми появились новообразованные вирусы (мелкие округлой формы образования). С помощью ПЦР ВИЧ-инфицированность выявляется уже через 1 — 2 недели после предполагаемого заражения.

Преимущества методики ПЦР при ВИЧ

• С помощью ПЦР возможно выявить сам вирус и его количество.
• Возможность использования у детей младше полутора лет.
• Проводить оценку эффективности лечения.
• Определить тяжесть и прогноз заболевания.

Недостатки методики ПЦР при ВИЧ

• Большая стоимость исследования.
• Наличие специализированных лабораторий.
• Длительность получения результатов (до 4-х недель).

Кому проводится ПЦР

1. Получение результата на 7 — 10 день лицам в случае предполагаемого инфицирования, когда желателен результат, полученный в короткие сроки.
2. Для определения срока начала и оценки эффективности проводимого лечения.
3. ПЦР проводится инфицированным беременным за 4 недели до родов с целью решения вопроса о применения кесарево сечения.
4. Новорожденным от инфицированных матерей. Дважды полученный положительный результат свидетельствует о заражении ребенка.

В обычных условиях для скрининга и диагностики ВИЧ-инфекции ПЦР не используется

РНК ПЦР и ДНК ПЦР. В чем разница

• РНК ПЦР доказывает факт наличия вируса иммунодефицита в крови и объем выявленной РНК. Данное исследование применяется у диагностированных лиц с целью оценки эффективности проводимой терапии.
• С помощью ДНК ПЦР определяется наличие вируса в мононуклеарных клетках у детей, когда антитела к вирусу иммунодефицита человека у матери мешает использовать методику ИФА.

Вирусная нагрузка определяется путем подсчета количества РНК-копий в 1 мл плазмы крови, что позволяет определить стадию заболевания, провести анализ проводимого специфического лечения, определить тяжесть и прогноз заболевания. Чем выше вирусная нагрузка, тем меньше в плазме крови регистрируется CD4-лимфоцитов.

Интерпретация результатов:

• РНК либо не выявлена, либо число копий РНК менее 20 в 1 мл. плазмы.
• РНК выявлена на пределе чувствительности — менее 20 копий/мл.
• РНК от 20 до 10 6 копий в 1 мл плазмы крови говорит о достоверности результата.
• РНК-копий более 10 6 мл — верхний предел линейного диапазона.

Увеличение вирусной нагрузки у больного с ВИЧ-инфекцией в три и более раза является клинически значимым результатом.

Контроль над вирусной нагрузкой проводится каждые 3 месяца у больных, лечение которым еще не проводится. В случае начала проведения антиретровирусной терапии контроль осуществляется через 2 — 8 недель.

Рис. 14. ПЦР в последние годы пользуется все большей популярностью.

Рис. 15. Амплификаторы для проведения ПЦР.

Тест на ВИЧ необходимо проводить на ранних сроках инфицирования и периодически при заболевании, что обеспечит своевременное назначение антиретровирусной терапии предупреждение и развития грозных инфекционных и онкологических процессов.

Культивирование вируса

Обнаружить вирусы, его РНК, ДНК, антигены и антитела можно не только в сыворотке крови, но и сперме, слюне, содержимом влагалища и др. Культивируют ВИЧ в культуре клеток лимфоцитов. Методика является высокочувствительной и специфичной (до 100%), однако дороговизна исследования не позволяет его использовать в повседневной лабораторной работе.

Общий анализ крови на ВИЧ

В результате поражения вирусами иммунодефицита человека кроветворных органов отмечается угнетение кроветворения, что проявляется снижением числа лимфоцитов (лимфопения), нейтрофилов (нейтропения), тромбоцитов (тромбопения) и анемия. К тому же на разрушение клеточных популяций оказывают влияние аутоиммунные процессы, развивающиеся у ВИЧ-инфицированных больных. В сыворотке крови больных доминирут иммуноглобулины IgG.

Рис. 16. Забор крови из вены и пальца для анализов.

Сегодня сдать анализ на ВИЧ можно любому человеку анонимно и бесплатно за считанные минуты, а современное оборудование и обученный персонал позволяют получить максимально точные результаты.

Анализы на любые инфекции требуют досконального изучения. При соблюдении всех рекомендаций можно получить максимально точный результат тестирования. Сегодня предстоит понять, как сдать анализы на ВИЧ. Что это за заболевание? Чем оно опасно? Как сдают анализы в том или ином случае? Какие советы и рекомендации врачей помогут получить максимальную результативность? В каких организациях можно его сдать? Обо всем этом рассказано далее. В действительности нет ничего сложного в сдаче анализа при современных технологиях.

ВИЧ-инфекция - это...

Первым делом следует понять, с какой инфекцией будет иметь дело пациент. Это опасное заболевание. Оно передается преимущественно половым путем, но есть и другие варианты заражения. В ходе развития недуга организм перестает вырабатывать антитела к разнообразным инфекциям. Как следствие, человек может умереть от любой болезни, даже от обычной простуды.

Также имеется более сложная форма иммунодефицита, неизлечимая и крайне опасная. Речь идет о СПИДе. Это заключительный этап развития ВИЧ-инфекции. Как уже было сказано, избавиться от него нельзя. А вот на ранних этапах недуг лечится в современной медицине. Но только при своевременной диагностике заболевания. Как сдать анализы на ВИЧ? Что должен узнать каждый потенциальный пациент перед процедурой?

Экспресс-анализ

Например, о том, какие варианты исследований предлагаются на практике. Это немаловажный нюанс. Ведь от выбранной методики диагностики заболевания зависит результативность конечного итога.

Иногда в медицинских учреждениях на ВИЧ-инфекцию проверяют посредством специального экспресс-теста. Для этого берется немного биологического материала у пациента, затем он наносится на специальную тест-полоску. По результатам ее окрашивания можно определить наличие заболевания в организме.

Подобное исследование на практике не слишком часто используется. Поэтому многие задумываются над тем, как сдать анализы на ВИЧ, а также куда обратиться с данным запросом. Какие еще методики диагностики имеют место?

Анализ мочи

Например, предлагается сделать анализ мочи. Как общий, так и на ВИЧ. Подобная методика не является основной, она не отличается своей точностью. Только на практике это исследование помогает подтвердить или опровергнуть результаты ранее полученных анализов.

Как сдается моча для определения ВИЧ-инфекции у человека? Точно так же, как и для любого другого исследования. Достаточно собрать немного урины в герметичную емкость и сдать ее в исследовательскую лабораторию.

Важно помнить, что наиболее точный анализ будет проведен только в том случае, если биологический материал взят на исследование не позднее 2 часов с момента его получения. Поэтому рекомендуется как можно быстрее отвезти урину в лабораторию.

Кровь на антитела

Сдать анализы на ВИЧ и гепатит не сложно. Главное - определиться с методикой диагностики тех или иных заболеваний. Наиболее распространенным методом является сдача крови и ее исследование на наличие антител к вирусам. Подобное тестирование позволяет максимально быстро и точно определить, сталкивался ли пациент с болезнью, или нет.

Как правило, подобное исследование так и называется: "Анализ на ВИЧ". У пациента берут немного крови и проводят соответствующие процедуры для выявления антител вируса иммунодефицита. Результаты приходят или положительные, или отрицательные. Их показывают пациентам.

Откуда берут кровь

Где сдать анализы на ВИЧ? Что потрбуется для максимальной точности? Кровь для соответствующего анализа берется преимущественно из вены. Но это не единственный вариант.

В некоторых случаях можно сдать кровь из пальца. Данная методика была распространена несколько лет назад. Также подобный анализ проводится при диагностике ВИЧ и СПИДа у детей.

Крайне редко берут кровь из ушной раковины. Тем не менее как реально существующий метод забора биологического материала он лабораториями не рассматривается.

Куда обратиться

Следующий важный вопрос: где можно сдать анализы на ВИЧ? Мало знать о методике диагностики того или иного заболевания. Требуется дополнительно понять, в какие учреждения обращаться для соответствующих исследований.

Проведением анализов занимаются медицинские лаборатории. Именно сюда может прийти каждый житель страны и сдать биологический материал для обнаружения тех или иных заболеваний.

Если человек задумался, где можно сдать анализы на ВИЧ, он может обратиться:

• в государственные поликлиники;
• бесплатные больницы;
• частные клиники/медицинские центры;
• частные медицинские лаборатории.

В них выполняется данное исследование. На практике чаще всего предпочтение отдается частным медицинским центрам и лабораториям. За определенную плату всего в течение нескольких дней клиент получает результат исследования с предельно понятной расшифровкой.

Когда сдавать

Немаловажным является момент, когда гражданину сдать анализ на ВИЧ. Далеко не всегда результат проведенного исследования будет максимально информативным и точным.

Если гражданин подозревает заражение ВИЧ, не рекомендуется сразу же бежать в больницу и сдавать кровь (или иной биологический материал) для дальнейшего исследования. Ведь в организме антитела к ВИЧ начинают вырабатываться не сразу. Поэтому пациент способен получить ложноотрицательный результат. А на самом деле инфекция будет лишь расти и распространяться по организму.

Через сколько сдавать анализ на ВИЧ после предполагаемого заражения? Можно и сразу обратиться в лабораторию. Но если результат отрицательный, лучше будет сходить в клинику вновь через 3 недели.

Еще один нюанс - исследование проводится позже указанного ранее срока. Через сколько сдавать анализ на ВИЧ? Обязательно проведение обследования организма через 90 дней с момента предполагаемого заражения. Если ответ отрицательный, а пациент не контактировал с носителями инфекции, можно считать результат точным.

Причины для сдачи анализа

Итак, как действовать в том или ином случае, понятно. А где сдать анализы на ВИЧ анонимно? Подобные услуги, как правило, оказывают во всех частных медицинских центрах.

Основной проблемой является то, что иммунодефицит никак не проявляет себя до определенного момента времени. Поэтому его легко не заметить. Сколько раз проводить соответствующее исследование? Это решает каждый для себя самостоятельно.

• после изнасилования;
• если имел место любой половой контакт без защиты с новым партнером;
• наличие резкого похудения без видимых причин;
• если человек воспользовался нестерильными иглами;
• при ранениях от игл (при отсутствии стерильности);
• если у партнера обнаружен СПИД или ВИЧ;
• при наличии любых заболеваний, передающихся половым путем.

Также необходимо учесть, что все беременные женщины обязательно сдают анализ на вирус иммунодефицита. Требуется исследование для того, чтобы беременная женщина не рожала в обсервации.

Правила сдачи анализа

Итак, мы выяснили, где именно можно сдать анализы на ВИЧ и гепатит, а также на иные инфекции, передающиеся половым путем. Каких правил рекомендуется придерживаться, чтобы получить максимально точные результаты исследования?

1. Кровь обязательно сдается натощак. Желательно не принимать пищу на протяжении последних 8 часов. То же самое касается напитков.
2. Идеальным временем для сдачи анализа является утро. Связано это с тем, что человеку придется выдержать голодовку. Она не окажет серьезного влияния на организм, если пациент недавно проснулся.
3. За несколько дней до сдачи биологического материала придется ограничить употребление соленой, сладкой, жирной и жареной пищи. Фастфуд тоже придется исключить из рациона.
4. Рекомендуется отказаться за неделю (а лучше - за месяц) до исследования от вредных привычек. Они способны негативно влиять на все перечисленные анализы.
5. Для исследования мочи потребуется собрать именно утреннюю порцию. Она окажется самой информативной.
6. За 3-4 дня до анализа исключить половые контакты. Особенно в случае сдачи мочи.

Все эти советы помогут правильно подготовиться к процедуре. Где сдать анализы на ВИЧ анонимно? К примеру, в частной сети лабораторий "Инвитро". В России данная клиника широко распространена. А все перечисленные рекомендации способствуют получению наиболее точного результата.

Клинический и общий анализ крови

Трудно представить, но обычный анализ крови тоже способен помочь при диагностике данного заболевания. Как именно? По результатам исследования можно начать подозревать наличие инфекции в организме.

Все ранее перечисленные правила относительно подготовки к процедуре остаются в силе. Единственное, на что рекомендуется обратить внимание - на результаты исследования. Ведь при клиническом или общем анализе крови не будет никаких упоминаний о ВИЧ-инфекции. В подобном исследовании имеется множество иных показателей. В зависимости от них можно предположить наличие интересующей болезни в организме.

Расшифровка

Предположим, что гражданин решил, где ему сдать анализ на ВИЧ. Анонимно или нет - не важно. Но перед этим пациент решает провести общий и клинический анализ крови. На какие особенности данного исследования обратить внимание? При каких обстоятельствах рекомендуется проводить анализ на выявление ВИЧ-инфекции?

• СОЭ увеличивается;
• количество лейкоцитов снижается;
• тромбоциты уменьшаются;
• гемоглобин снижается.

Именно такая интерпретация общего или клинического анализа крови должна подтолкнуть к дополнительным исследованиям. Где сдать анализ на ВИЧ? В любом медицинском центре или поликлинике.

А как быть, если человеку пришел результат обследования на ВИЧ? Можно полагаться на следующую расшифровку (при количественном анализе) :

• < 20 копий/мл - неточный результат, требуется проведение повторного исследования;
• 20-10 6 копий/мл - заражение ВИЧ;
• > 10 6 копий/мл - верхний предел достигнут, есть подозрения на СПИД.

В остальных случаях обычно на пришедших результатах указывается точное наличие или отсутствие изучаемой инфекции. Либо в соответствующей строке будет отмечен "+" либо "-".

Итоги и выводы

Где предлагается сдать анализ на ВИЧ анонимно без особого труда, понятно. И что требуется для получения максимально точного результата - тоже. Для пациента данный процесс мало чем будет отличаться от обычной сдачи крови на любое исследование. Подготовка к процессу аналогична.

Где сдать анализы на ВИЧ анонимно? Данная услуга предусматривается в медицинских лабораториях и клиниках. Она пользуется огромным спросом. В России сейчас рекомендуется тщательнее следить за своим здоровьем и хотя бы раз в год проводить изучаемое исследование. Где, можно ли сдавать анализы (ВИЧ) анонимно, как правильно подготовиться к процессу? Ответы на данные вопросы больше не являются загадкой.